- تعیین میزان کورکومین در سرم خون به روش میکرو استخراج مایع- مایع پخشی مبتنی برانجماد قطره آلی شناور(dllme-sfo). 2- اندازه?گیری میزان آمین?های بیوژنیک به روش میکرو استخراج مایع- مایع پخشی مایع یونی با کمک امواج فرا??صوتی همزمان با مشتق?سازی (sd-il-based usa-dllme)

چکیده بخش اول روش میکرواستخراج مایع-مایع پخشی مبتنی بر انجماد قطره آلی شناور(dllme-sfo) برای پیش?تغلیظ و اندازه گیری کورکومین در سرم خون توسعه یافت. در این روش، کورکومین از مخلوط 3/1 ml سرم واستون (حلال پخش?کننده) در µl50، 1-دودکانول (حلال آلی) بعد از تزریق سریع در ml5/4 محلول آبی استخراج شد. از یک لوله شیشه?ای گردن باریک (nngt) اخیرا طراحی شده برای جمع?آوری سریع و ساده فاز آلی منجمد از سطح نمونه بعد از سانتریفیوژ و سرد شدن در حمام یخ استفاده شد. اثرات پارامترهای قدرت یونی، حجم حلال?های استخراج و پخش?کننده و ph با روش?های طراحی فاکتوریال و تحلیل سطح پاسخ بهینه شدند. اندازه?گیری?ها در طول بهینه?سازی به روش اسپکتروفوتومتری uv و در طول موج nm419 انجام شدند اما استخراج در نمونه?های سرم برای اندازه?گیری نهایی با تزریق در ستون hplc صورت گرفت. در شرایط بهینه، استخراج کمی کورکومین از نمونه?های سرم با بازده %5/95 و rsd، % 8 برای شش اندازه?گیری تکراری به دست آمد. منحنی کالیبراسیون برای روش hplc با r2، 990/0 تا µg ml-14 خطی است. حد تشخیص روش محاسبه شده از ?3، ng ml-12/1به دست آمد. این روش برای اندازه?گیری کورکومین در نمونه های سرم انسان با نتایج رضایت?بخشی به کار برده می?شود. یک وسیله قابل حمل با ستون سرد استخراجی که بر اساس برنامه?ریزی دمایی طراحی شده است ، تا حد قابل قبولی جداسازی نمونه?ی کورکومین را به صورت فیزیکی انجام می?دهد. مزیت مهم استفاده از این ستون، حذف مرحله? سانتریفیوژ و نیز کمتر شدن مدت زمان جداسازی نسبت به روشdllme-sfo است. در روش?های متداول برای انجام مرحله سانتریفیوژ، انجماد در حمام یخ و برداشتن قطره وذوب نمودن تقریبا مدت زمان زیادی صرف می?شود. بررسی و بهینه?سازی پارامترهای دمای حداکثر، دمای حداقل، حجم حلال شویش و حجم فاز آبی برای ستون سرد انجام شد. در شرایط بهینه، استخراج کمی کورکومین از نمونه?های سرم با بازده % 90 و rsd، % 2/4 برای هشت اندازه?گیری تکراری به دست آمد. حد تشخیص روش ng ml-1 7/15 محاسبه شد. بخش دوم آمین?های بیوژنیک در انواع گوناگونی از مواد غذایی تخمیر شده و تخمیر نشده وجود دارند. بنابراین اندازه?گیری آمین های بیوژنیک در محصولات غذایی قبل از به مصرف رساندن، در تشخیص و شناسایی خطرات بالقوه برای سلامتی انسان مهم است. در این بررسی کاربرد روش میکرواستخراج مایع- مایع پخشی مایع یونی به کمک امواج فرا?صوتی همزمان با مشتق سازی(sd-il-based usa-dllme) در ترکیب با کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا برای آنالیز سه آمین بیوژنیک در سرم خون ارائه شده است. آنالیت به طور همزمان در یک قطره میکرو مایع یونی مشتق?سازی و پیش?تغلیظ شد. روش تحلیل سطح پاسخ برای بهینه?سازی فاکتورها در این روش استفاده شد. در شرایط بهینه، µl90 استون، µl 95 مایع یونی ([bmim] pf6) و µl10 بنزوئیل کلراید به سرعت در ml4 محلول نمونه تزریق شد. محلول نمونه شامل نمونه سرم رقیق شده با hcl، m1/0 وسدیم هیدروکلراید mol l-17/1 است. محلول نمونه به مدت 2 دقیقه به شدت بهم زده شد و سپس در دمای c ? 20 به مدت 20 دقیقه قرار داده شد. محلول ابری به مدت 10 دقیقه در حمام اولتراسونیک قرار گرفت. مایع یونی در محلول آبی پخش شده و محلول تقریبا هموژنی بدست آمد. سپس، ml 2 محلول سدیم کلراید به محلول اضافه شده و به مدت 6 دقیقه با دور rpm 2000 سانتریفیوژ شد. فاز آلی داخل یک میکروسرنگ کشیده شده و به دستگاه hplc تزریق شد. بازده به دست آمده با این روش در محدوده % 90 تا %105 می?باشد. rsd برای هفت بار تکرار روش استخراج معادل %4/11، % 9/5 و % 7 و حد تشخیص ppm 003/0،0035/0 و 015/0 به ترتیب برای آگماتین، تریپتامین و هیستامین محاسبه شد.